Vraag:
Wat zijn enkele goede praktijken die moeten worden gevolgd tijdens EPIC DNA-methyleringsgegevensanalyse?
deepseas
2017-06-07 01:58:15 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Ik heb onlangs wat gegevens van EPIC DNA-methylatie ontvangen en ik vroeg me af wat enkele goede praktijken zijn die ik moet volgen? Ik ben geïnteresseerd in kennis over normalisatie en differentiaalanalyse. Dank je.

Hallo deepseas, welkom en bedankt voor het plaatsen van een vraag op Bioinformatics StackExchange. Ik heb een link toegevoegd naar de Infinium EPIC-webpagina voor mensen die misschien nieuwsgierig zijn naar wat EPIC DNA-methylatiegegevens zijn. Uw vraag is vrij breed en zou aanzienlijk worden verbeterd door meer van een verhaal toe te voegen achter waarom u deze analyse wilt doen (bijv. Is dit een enkele individuele studie? Wilt u vergelijken met RNASeq-gegevens?). Bio-informatica is een zeer groot vakgebied en er zijn veel verschillende manieren om [bijna] hetzelfde te doen, dus elke hulp bij het verhelderen van vragen wordt zeer op prijs gesteld.
Dank je voor het antwoord! Deze gegevens hebben 16 monsters van verschillende individuen met 5 groepen (5 + 6 + 1 + 2 + 2). Het zal moeilijk zijn om macht te krijgen voor groepen met 1 en 2. maar het belangrijkste doel is om een ​​idee te krijgen van bepaalde bekende genen die van belang zijn.
Het zal moeilijk zijn om contrasten zoals edgeR, limma of deseq2 te maken met een laag aantal replica's per conditie. 2 kan nog steeds werken, maar 1 in een enkele toestand zal niet goed blijven. Idealiter, wanneer u met EPIC-arrays of 450k werkt, werken beide met elk standaard 450k-analysetool. Probeer tools zoals DimMER / Rnbeads. Het gaat echter beter met hogere herhalingen per groep. Het beste!
Een antwoord:
Ben D.
2017-06-07 04:10:15 UTC
view on stackexchange narkive permalink

EPIC-gegevens kunnen op dezelfde manier worden verwerkt als de vorige iteratie van methyleringsarray-gegevens van Illumina (450k). Dit betekent dat beginnend met .idat-bestanden, normalisatie moet worden uitgevoerd (bijvoorbeeld via het minfi-pakket). Een recent artikel van de makers van minfi is bijzonder nuttig omdat het duidelijk maakt dat genormaliseerde EPIC-gegevens uit hun pakket onmiddellijk kunnen worden vergeleken met bijvoorbeeld niveau 3 TCGA-gegevens.

Daarna stel ik voor om het manifest te gebruiken om genomische coördinaten aan je sondes te koppelen en ze te scheiden in functionele regio's. Door differentiële methylering bijvoorbeeld alleen in gereguleerde regio's te testen, kunt u het statistische vermogen vergroten door het totale aantal tests te verminderen tot degene waarvan u verwacht dat ze grote verschillen opleveren.

Er zijn bestaande pakketten voor differentiële methyleringsanalyse, maar zonder uw replicatiestructuur of doelstellingen te kennen, is het moeilijk om u in de goede richting te wijzen.



Deze Q&A is automatisch vertaald vanuit de Engelse taal.De originele inhoud is beschikbaar op stackexchange, waarvoor we bedanken voor de cc by-sa 3.0-licentie waaronder het wordt gedistribueerd.
Loading...